目的

本研究旨在建立一种高效的结直肠癌循环肿瘤细胞（CTC）分选系统，并探讨CTC代替肿瘤组织进行基因突变检测的可行性。

方法

建立EpCAM与Vimentin抗体修饰的CTC分选系统。通过细胞实验检测CTC分选系统对结直肠癌细胞的分选效率，并对30例结直肠癌患者的CTC进行捕获计数。利用NGS检测患者肿瘤组织样本中热点突变基因，并通过Sanger测序检测血液CTC中热点突变基因，分析肿瘤组织与血液CTC热点基因突变的一致性。

结果

本研究构建的CTC分选系统具有较好的分散性、稳定性及较低的细胞毒性，特异度为90.54%，敏感度为89.07%。结直肠癌患者血液中CTC平均数为（10.90±5.11）个/7.5 mL。通过CTC检出的高频突变基因（TP53、KRAS、EGFR、BRAF、APC、PIK3CA）与组织检测均具有较高的一致性，所有基因总体突变的一致率为（92.89±4.89）%。

结论

基于Ep-LMB/Vi-LMB依次富集的CTC分选系统能够对结直肠癌患者外周血中CTC进行高效捕获。将捕获的CTC用于临床上的热点基因突变检测，在一定程度上解决了肿瘤组织取材困难的问题，具有重要的临床意义。